“夫婦染色體核型正常，胚胎染色體異常”為啥？

復(fù)發(fā)性流產(chǎn)，病因錯綜復(fù)雜，其中遺傳因素是重要原因之一，臨床常用染色體核型分析檢測作為遺傳因素的篩查，被臨床醫(yī)生視為染色體疾病診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”。但我們在工作中遇到出現(xiàn)多次胎停，而夫婦雙方染色體核型正常，我們該如何給予合理咨詢和備孕指導(dǎo)呢？

下面分享一個病例

患者李女士

第一次，2014年自然懷孕，孕6+周可見胎芽胎心，胎停后行清宮術(shù)；

第二次，2016年自然懷孕，孕6+周可見胎芽胎心，胎停后行清宮術(shù)；隨后于2016年在外院完善了基礎(chǔ)篩查，其中夫妻常規(guī)染色體（320條帶）為46，XX/46,XY,男方染色體報告如下：

第三次，2018年7月行ICSI助孕，孕11+周，胎停后行清宮術(shù)。孕后曾在某三甲醫(yī)院治療用藥：肝素、ASA、CSF。胚染：5號染色體5q35.2-q35.3處缺失4.29Mb區(qū)域 ；

第四次，2019年8月行ICSI助孕，孕11+周，胎停后行清宮術(shù)。孕后曾在某三甲醫(yī)院治療用藥：肝素、ASA、CSF、IVIG，未行胚染檢查；

第五次，2022年3月自然懷孕，孕19周因羊水穿刺CNVs診斷：5號染色體4.32Mb缺失，致病性；20號染色體5.70Mb重復(fù)，可能致病性，孕25+周行引產(chǎn)術(shù)。報告如下：

回顧病史

高度懷疑夫妻雙方染色體存在平衡易位風(fēng)險。夫婦雙方進(jìn)行了“高分辨率染色體核型分析”，明確男方染色體核型分析：46,XY, t(5;20)(q35. 2;p12.3)。結(jié)果如下：

回看兩次胚染結(jié)果，專門針對5號、20號染色體仔細(xì)檢查，建議行FISH進(jìn)一步檢查。結(jié)果如下：

檢測結(jié)果顯示女方未見異常，而男方為5號染色體長臂與20號染色體短臂相互易位，明確男方染色體平衡易位攜帶，指導(dǎo)李女士行PGT 助孕。2023年8月、10月取卵2次共獲得21枚囊胚，級別非常優(yōu)秀，但經(jīng)過PGT篩查，獲得3枚可移植胚胎（1枚正常胚胎，2枚5號和20號染色體異位攜帶者胚胎）。

染色體平衡易位是指染色體的片段發(fā)生位置改變，但遺傳物質(zhì)總量沒有發(fā)生改變的情況。因遺傳物質(zhì)其總量無變化，大多數(shù)無臨床表型，但平衡易位攜帶者的生殖細(xì)胞在減數(shù)分裂過程中往往會形成不正常配子，從而導(dǎo)致非平衡易位，造成胚胎染色體異常，出現(xiàn)反復(fù)流產(chǎn)、死胎或生育畸形胎兒。

染色體平衡易位是常見的染色體結(jié)構(gòu)異常，發(fā)生率約為 1‰-2‰。理論上來說，兩條平衡易位攜帶者的生殖細(xì)胞在減數(shù)分裂過程中會形成 18 種不同類型的配子，與正常核型配子結(jié)合可形成 18 種合子，其中1種為完全正常，1 種為平衡易位攜帶者，其余 16 種均為部分三體、單體或單體合并三體型等。

除完全正常和平衡易位攜帶者可正常發(fā)育外，其余類型合子均會導(dǎo)致流產(chǎn)、死胎等不良妊娠結(jié)局。易位攜帶核型的子代到了育齡期，將面臨和親代同樣的生育困擾。所以，患者李女士是不幸的，但又是幸運(yùn)的，能夠篩選出3枚可移植胚胎。

熒光原位雜交fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH

FISH技術(shù)

是一種重要的非放射性原位雜交技術(shù)，出現(xiàn)于20世紀(jì)70年代末的遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)。根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則，通過特殊手段使帶有熒光物質(zhì)的探針與目標(biāo)DNA接合，最后用熒光顯微鏡即可直接觀察目標(biāo)DNA所在的位置。

FISH優(yōu)點(diǎn)

能夠檢測染色體結(jié)構(gòu)變異，可以較容易地檢測出缺失、附加或替換的染色體。能夠用于識別染色體重組、斷裂點(diǎn)分布、鑒別染色體外核物質(zhì)的起源?？蓹z出亞端?；蛉旧w其他部位（如已知微缺失綜合征部位）的異常。一直以來，染色體核型分析技術(shù)被認(rèn)為是確診染色體畸變的“金標(biāo)準(zhǔn)”，也是診斷染色體疾病的一線首選方法，但其檢測周期長、分辨率較低，無法檢出5Mb 以下的基因組拷貝數(shù)變異（CNVs）。對于過小片段（小于3-5Mb)的染色體平衡易位，可以通過FISH檢測進(jìn)行驗(yàn)證，彌補(bǔ)了染色體核型檢測技術(shù)的壁壘。

FISH缺點(diǎn)

無法對整個基因組進(jìn)行篩查，該技術(shù)要建立在已知的核型或芯片分析基礎(chǔ)上分析，是一項(xiàng)靶位點(diǎn)限制性技術(shù)。所以，對于未知的染色體異常，F(xiàn)ISH技術(shù)則無能為力。

醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)，沒有十全十美的檢測技術(shù)，針對胚胎出現(xiàn)的染色體異常的結(jié)果，針對性進(jìn)行遺傳相關(guān)檢測，進(jìn)一步分析，以彌補(bǔ)“金標(biāo)準(zhǔn)”的不足之處，指導(dǎo)科學(xué)備孕。通過李女士的病例，我們建議復(fù)發(fā)性流產(chǎn)病友，重視遺傳咨詢，夫婦染色體核型正常，胚胎染色體異常的情況，真的很常見！

文獻(xiàn)參考：

[1]吳新秀,李維芬,楊學(xué)煌等. 熒光原位雜交技術(shù)在不良孕產(chǎn)史患者診斷中的臨床意義 [J]. 黑龍江醫(yī)學(xué), 2016, 40 (05): 408-409.

[2]程世斌,朱韶華,賈春暘等. 一家系3例染色體平衡易位的遺傳學(xué)分析 [J]. 中國優(yōu)生與遺傳雜志, 2023, 31 (09): 1899-1902. DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2023.09.015

[3]袁振亞,袁牧,黃曉潔等. 平衡易位攜帶者61個胚胎植入前遺傳學(xué)檢測周期的結(jié)局分析 [J]. 中國衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)管理, 2022, 13 (21): 40-45.

[4]熒光原位雜交技術(shù)（fluorescent in situ hybridization, FISH）上海市胚胎源性疾病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 生殖遺傳科 2019-05-17